目的 探讨去甲斑蝥素(NCTD)对荷瘤裸鼠胆囊癌移植瘤的生长的抑制作用及其可能机制。 方法 在培养人胆囊癌 GBC-SD 细胞的基础上建立荷瘤裸鼠胆囊癌模型,应用NCTD对该动物模型进行移植瘤增殖、生长的抑制实验,实验分为空白对照、5-FU、NCTD、NCTD+5-FU 4 组;观测荷瘤鼠移植瘤大小、生长曲线和抑瘤率,应用流式细胞术、光学和电子显微镜、免疫组化技术观测移植瘤细胞的细胞周期、凋亡率、形态学改变和PCNA、Ki-67、Cyclin D1、p27基因蛋白表达。 结果 ① NCTD 对荷瘤鼠的半数致死量 (LD 50) 为 139.96 mg/kg,应用 1/5 LD 50 即可使裸鼠移植瘤明显变小 [(5.61±0.39) vs. (9.78±0.61)cm3,P <0.05 ) ],抑瘤率上升( 42.63% );与 5-F U 合用时上述作用更明显。 ② 经NCTD作用后的裸鼠移植瘤细胞,流式细胞术示S期细胞减少、细胞凋亡率上升;光镜检查见细胞核固缩,核碎裂等现象;电镜显示微绒毛卷缩蜷缩、断裂、高尔基体、线粒体等细胞器衰退,可见典型的凋亡细胞及被巨噬细胞吞噬的凋亡小体。 ③ 免疫组化检测显示,NCTD 组 PCNA、Ki-67、cyclin D1 表达下降,p27 表达上升,与 5-FU 联合应用时作用明显。 结论 NCTD 可明显抑制荷瘤裸鼠胆囊癌移植瘤的增殖和生长,若与 5-FU 合用则呈协同效应以加强其抗癌作用;其机制可能与NCTD干扰 荷瘤鼠胆囊癌移植瘤细胞周期,抑制细胞增殖,诱导细胞凋亡,以及改变细胞增殖、细胞周期调控相关基因蛋白表达有关。
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